Биотиновые пептиды

Что такое биотинилированные пептиды?

Биотинилированные пептиды представляют собой пептиды, которые были модифицированы для включения биотинового фрагмента. Эта модификация использует преимущество высокого-аффинного взаимодействия между биотином и авидином или стрептавидином, которое широко используется в биологических и биохимических приложениях. Молекула биотина небольшая, стабильная и не меняет существенно структуру или функцию пептида, в то же время обеспечивая высокоэффективный захват или обнаружение с помощью систем на основе авидина-.

 

Химическая модификация
Биотин обычно вводится через реагент NHS-биотин (N-гидроксисукцинимид биотин), который реагирует с первичными аминогруппами, обнаруженными на N-конце пептида, или остатками лизина, образуя стабильную амидную связь.

生物素(биотин) 肽(пептид)

СООН NH₂

| |

+---EDC/NHS ---→ 活化羧基（Активация） → 缩合（Соединение）

↓ ↓

Биотин-CONH-пептид

 

Аффинити-взаимодействие
Биотинилированный пептид может прочно связываться (Kd ~10⁻¹⁵ M) с авидином или стрептавидином, что делает его идеальным для использования в анализах, требующих точного обнаружения, захвата или иммобилизации.

Случаи синтеза биотинилированных пептидов

Пептидная последовательность: биотин-Ahx-YXXXXXRXRRR-NH2

Длина: 11А

Purity: >95%

M.W: 1898.32

Пептидная последовательность: биотин-YXXXXXRXRRR--ERXXXDLXXXXPVXXXXPRR

Длина: 31А

Purity: >95%

M.W: 4145.89

 

Применение биотинилированных пептидов

Биотинилированные пептиды являются универсальными инструментами в исследованиях и промышленности с широким спектром применений, в том числе:

Аффинная очистка

Используется для очистки партнеров по связыванию, таких как белки, антитела или нуклеиновые кислоты, путем иммобилизации биотинилированного пептида на шариках стрептавидина.

ИФА и вестерн-блоттинг

Биотинилированные пептиды действуют как зонды для обнаружения специфических взаимодействий в сочетании с авидин-HRP или авидин-флуоресцентными метками.

Поверхностный плазмонный резонанс (ППР)

Используется для иммобилизации пептидов на биосенсорных чипах для исследований взаимодействия.

Открытие наркотиков

Скрининг кандидатов на лекарственные средства путем анализа их связывания с биотинилированными пептидами-мишенями.

Иммунология

Биотинилированные пептиды используются для картирования эпитопов, изучения взаимодействия антиген-антитело и проведения анализов Т-клеток.

Картирование эпитопов для разработки вакцин

Специальный биотинилированный пептид был использован для идентификации антигенных эпитопов вирусного белка, что помогло разработать кандидатную вакцину.

Белки-Исследования взаимодействия белков

Биотинилированные пептиды, иммобилизованные на пластинах, покрытых стрептавидином-, позволили изучить взаимодействия рецепторов-лигандов, выявив аффинность связывания, важную для разработки лекарств.

Оптимизация иммуноанализа

В диагностическом анализе биотинилированные пептиды использовались в качестве антигенов для повышения чувствительности и специфичности ELISA для обнаружения биомаркеров заболеваний.

 

Ссылки

1. Грин, Нью-Мексико (1975).Авидин и стрептавидин.Биохимический журнал, 131(3), 781-791.

2. Шайет Л. и Вольф Ф.Дж. (1964).Свойства стрептавидина — биотин-связывающего белка, продуцируемого Streptomyces.Архив биохимии и биофизики, 106 (1), 1-5.

3. Финн Ф.М. и Титус Г. (1994).Биотинилирование белков в исследованиях и биотехнологиях.Анальная Биохимия, 218(1), 1-7.