Пептидно-конъюгированный KLH, BSA или OVA

Короткие пептиды обычно слишком малы, чтобы вызвать достаточный иммунный ответ. Следовательно, необходимо конъюгировать пептид с более крупным белком-носителем, чтобы стимулировать сильный иммунный ответ и генерировать высокие уровни специфических антител. Biorunstar предлагает следующие наиболее часто используемые белки-носители для пептидных конъюгатов:

KLH (гемоцианин улитки, молекулярная масса 4,5 × 10⁵ - 1.3 × 10⁷ Да) представляет собой медь-содержащий белок, выделенный изМегатура кренулатаи обычно является белком-носителем-первого выбора из-за его высокой иммуногенности. Пептиды, конъюгированные с KLH, часто имеют ограниченную растворимость в воде из-за размера и структуры белка; однако это не влияет на его иммуногенность, и мутные растворы по-прежнему можно использовать для иммунизации.

БСА (бычий сывороточный альбумин, молекулярная масса 67 × 103 Да) является популярным белком-носителем слабоантигенных соединений благодаря доступным остаткам лизина. Будучи меньшим по размеру, BSA более водо-растворим, чем KLH, и обычно используется в иммуноанализах. Однако, поскольку БСА часто используется для блокирования неспецифического связывания, конъюгаты БСА не следует использовать для иммунизации, если в системе анализа используется БСА, поскольку это может привести к ложноположительным результатам из-за антител против БСА в антисыворотке.

OVA (овальбумин, молекулярная масса 45 × 103 Да) — белок, выделенный из куриных яиц. Его обычно используют в качестве контрольного белка-носителя для проверки специфичности антител к целевому пептиду, а не к белку-носителю (например, KLH/BSA).

Как правило, выбор химического метода конъюгации зависит от предоставленной последовательности антигенного пептида.