Среда для размножения и субклонирования гибридомных клеток

产品信息 Описание продукта

产品名称

Название продукта

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Среда для размножения и субклонирования гибридомных клеток

货号 Кат.№

БРС-MED02

规格

Спецификация

500 мл/куб.

500 мл/флакон

产品组分

Компоненты

Скорость передачи данных DMEM: 80% (по умолчанию)

Базовая среда DMEM: 80% (об./об.)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Фетальная бычья сыворотка (FBS, импортная): 10% (об./об.)

条件培养基:10%(体积比)

Кондиционированная среда: 10% (об./об.)

Производительность: 100 мл/мл.

Пенициллин: 100 Ед/мл

Производительность: 100 мл/мл.

Стрептомицин: 100 Ед/мл

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Другие добавки: факторы пролиферации отдельных-клеток и низкомолекулярные добавки.

保存条件

Условия хранения

-20 градусов по китайскому времени, 18 по европейскому времени.

Хранить при -20 градусах, срок годности 18 месяцев.

使用方法

Инструкция по применению

培养基融化:

37 градусов 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

Продолжительность: 1 минута, 3–5 минут.

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Размораживание среды:

Разморозьте среду на водяной бане с температурой 37 градусов. Протрите внешнюю поверхность 70% этанолом и поместите в шкаф биобезопасности для использования.
Примечание. Появление небольшого количества белого хлопьевидного материала после оттаивания является нормальным. Дайте среде постоять 3–5 минут, чтобы хлопья осели, затем соберите надосадочную жидкость для использования.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄, 且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等).

Обращение со слитыми лунками – здоровые клетки:

Для лунок слияния с клетками в хорошем состоянии (например, средний цвет нормальный или слегка желтый, клетки под микроскопом выглядят здоровыми, яркими и нормального размера) аккуратно пипетируйте вверх и вниз желтым кончиком пипетки. Подсчитайте клетки и поместите пластину из расчета 0,8–1,5 клеток на лунку в 200 мкл среды.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Обращение со слитыми лунками – неоптимальными ячейками:

Для лунок слияния с клетками в неоптимальном состоянии (например, подкисленная/желтая среда или клетки кажутся сморщенными, темными под микроскопом) доступны два варианта последующего субклонирования:

Производитель: 1 мл, 1 мл, 24 шт., 1 мл.板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1,5 ячейки/ячейка/200 мкл细胞倍增的次数有限且细胞状态良好, 非常适于亚克隆铺板;

Вариант 1: Перенесите клетки из лунки для слияния в 24-луночный планшет, содержащий 1 мл этой среды. После 2–3 дней расширения подсчитайте клетки и выполните субклонирование из расчета 0,8–1,5 клеток/лунку в среде 200 мкл. На этом этапе удвоение клеток ограничено, но состояние клеток хорошее, что делает их идеальными для субклонирования.

2-х литровый аккумулятор, 200 мкл, 200 мкл, 200 мкл, 200 мкл, 37% 5% CO2 в концентрации 3-4 градуса, в концентрации 0,8-1,5 ячейки на 200 мкл/200 мкл;

Осторожно удалите супернатант из лунки слияния с помощью желтого наконечника пипетки и добавьте 200 мкл свежей среды в каждую лунку. Инкубируйте при 37 градусах, 5% CO₂ в течение 3–4 часов. Затем отберите образцы клеток, подсчитайте и выполните субклонирование из расчета 0,8–1,5 клеток/лунку в среде 200 мкл.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Примечание. Субклоны, культивируемые со средой для размножения и субклонирования гибридомных клеток, обычно достигают стадии, подходящей для последующего скрининга или анализа, на 6–8 день после-субклонирования.